Sinh học phân tử- Thầy Lê Văn Duyệt
1. Định nghĩa: SHPT là phương pháp nhằm xác định phân tử nằm bên trong tế bào (ADN, ARN, Protein) 2. PCR: kĩ thuật cơ bản nhất của SHPT nhằm thăm dò, tìm hiểu cấu trúc gen, nhằm khuếch đại hay nhân dòng 1 đoạn gen nào đó muốn tìm hiểu đến số lượng đủ lớn để xác định sự có mặt của nó. 3. Số chu kì khuếch đại gen từ 30-45 chu kì tùy thuộc vào chất lượng bệnh phẩm: bệnh phẩm hô hấp là 30 chu kì, bệnh phẩm dịch não tủy là 40-45 chu kì. 4. Có nhiều loại PCR khác nhau - PCR Realtime - PCR phiên mã ngược - PCR đa mồi - Giải trình tự - PCR lồng - ADN tái tổ hợp - Lai phân tử ADN 5. Phân biệt: - Ngưỡng phát hiện - Giới hạn phát hiện trên - Giới hạn phát hiện dưới - Not detected - Dưới ngưỡng định lượng 6. PCR ứng dụng trong chẩn đoán - Ung thư - Bệnh di truyền - Bệnh truyền nhiễm 7. 5 bước cơ bản của PCR - Bước 1: Lấy mẫu - Bước 2: Xử lý mẫu (loãng đờm bằng NaOH, ly tâm DNT lấy cặn tìm vi khuẩn, ly tâm máu toàn phân lấy bạch cầu tìm Ricketsia- lớp váng trắng) - Bước 3: Tách chiết: dựa trên đ